近年來(lái)屢屢出現(xiàn)在食品中非法添加合成色素事件，合成色素日益成為影響食品安全的一個(gè)重要因素。這類色素的合成要經(jīng)過(guò)磺化、硝化、鹵化、偶氮化一系列化學(xué)反應(yīng)， 大多對(duì)人體

有一定危害作用， 偶氮類合成色素更具有致癌性。我國(guó)對(duì)于莧菜紅、胭脂紅、誘惑紅、日落黃、檸檬黃、亮藍(lán)、靛藍(lán)這幾類合成色素在食品中的使用有著嚴(yán)格的限量。誘惑紅是偶氮類化合物， 因此準(zhǔn)確測(cè)定食品中的誘惑紅對(duì)于食品安全有著重要意義。

   目前測(cè)定誘惑紅的標(biāo)準(zhǔn)有高效液相色譜法、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)法、示波極譜法等。常用的是高效液相色譜法和紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)法，本文研究?jī)煞N方法的優(yōu)劣，以期找到可以高效準(zhǔn)確測(cè)定誘惑紅的檢測(cè)方法。

   主要儀器：

   高效液相色譜儀(配有紫外檢測(cè)器; 色譜柱: C18 250mm×4.6mm粒度5μm)

   紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（上海光譜儀器有限公司）

   分析天平(精確到 0.0001g) （上海菁海儀器有限公司）

   離心機(jī)、實(shí)驗(yàn)室用水均為超純水。

   人工合成色素誘惑紅標(biāo)準(zhǔn)溶液，聚酰胺粉，乙醇－氨溶液，甲醇－甲酸溶液，檸檬酸溶液，乙酸，甲醇(色譜純)，乙酸銨。

   液相色譜條件：流速: 1.0 mL/min；柱溫:30℃；進(jìn)樣量:10μL；梯度:甲醇20%～35%，3% /min；35%～98%，9%/min；98%～98%，繼續(xù)6min；檢測(cè)波長(zhǎng):254nm；流動(dòng)相:甲醇－乙酸銨溶液

(0.02mol/L)。

   高效液相色譜法：將水果味糖果粉碎準(zhǔn)確稱取10g，加30mL乙醇－氨溶液溶解，水浴濃縮至 20 mL，加20%檸檬酸調(diào)節(jié)pH3.5～4.5，加熱至70℃，加0.8g聚酰胺粉，充分?jǐn)嚢瑁?0%檸檬酸調(diào)節(jié)pH3.5～4.5，加入少量水，使色素完全吸附。3000r/min離心3min。以乙醇－氨溶液解析， 加乙酸中和，定容至 100mL。經(jīng)0.45μm濾膜過(guò)濾后，吸取10μL進(jìn)樣。

   紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)法：將水果味糖果粉碎準(zhǔn)確稱取10g，加30mL溫水溶液溶解，用檸檬酸調(diào)節(jié)至pH4，加0.8g聚酰胺粉，充分?jǐn)嚢瑁股赝耆?。熱水洗去糖等物質(zhì)。并用甲醇 － 甲酸溶液洗三次，去除天然色素。再用70℃ 水洗至濾液為中性。然后用乙醇－氨溶液將合成色素解析下來(lái)。于水浴上驅(qū)除氨，將溶液蒸至2 mL，用50% 的乙醇溶液定容至5mL。

   從結(jié)果的可信度來(lái)看， 高效液相色譜法加標(biāo)濃度在300μg/g時(shí)，平均回收率為98.3%，符合《SN/T1743－2006食品中誘惑紅、酸性紅、亮藍(lán)、日落黃的含量檢測(cè) 高效液相色譜法》中的回收率要求；紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)法的兩個(gè)相差最大的平行試樣測(cè)定結(jié)果( 即0.0311和0.285) 的絕對(duì)差值是算術(shù)平均值的8.7%符合《GB/T5009.141－2003食品中誘惑紅的測(cè)定》的要求。

   從精密度來(lái)看， 高效液相色譜法的六個(gè)平行試樣測(cè)定結(jié)果的 RSD=0.7% ，紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)法的六個(gè)平行試樣測(cè)定結(jié)果的 RSD=4.1%，可見(jiàn)此實(shí)驗(yàn)中高效液相色譜法的精密度明顯高于紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)法。

   從方法的靈敏度來(lái)看，高效液相色譜法的檢出限是2.5mg/kg；紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)法的取樣量為10g時(shí)，檢出限是25mg/kg?？梢?jiàn)高效液相色譜法的靈敏度明顯低紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)法。

   由上述可以得出，在檢測(cè)糖果中合成色素誘惑紅含量時(shí)，高效液相色譜法優(yōu)于紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)法。